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      湖北省疾病預防控制中心

      血吸蟲病診斷標準(WS261-2006)

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      時間:2015-06-18 08:00:00來源:血防所  點擊量:
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      范圍

      本標準規定了血吸蟲病的診斷依據、診斷原則、診斷標準和鑒別診斷。

      本標準適用于全國各級疾病預防控制機構和醫療機構對血吸蟲病的診斷。

      術語和定義

      下列術語和定義適用于本標準:

      2.1血吸蟲病

      是由血吸蟲寄生于人體內所引起的寄生蟲病。在我國特指日本血吸蟲病,是由日本血吸蟲寄生于人和哺乳動物體內所引起的疾病。

      2.2急性血吸蟲病

      由于人在短期內一次感染或再次感染大量血吸蟲尾蚴而出現發熱、肝臟腫大及周圍血液嗜酸粒細胞增多等一系列的急性癥狀。潛伏期大多為30d60d,平均約41.5d

      2.3慢性血吸蟲病

      是指人體經常接觸疫水或少量多次感染血吸蟲尾蚴使臨床表現較輕,或無癥狀、體征。急性血吸蟲病未治愈者,也可演變為慢性血吸蟲病。

      2.4晚期血吸蟲病

      是指出現肝纖維化門脈高壓綜合征,嚴重生長發育障礙或結腸顯著肉芽腫性增殖的血吸蟲病患者。病人由于反復或大量感染血吸蟲尾蚴,未經及時、徹底的治療,一般經過2年~10年的病理發展過程,可演變成晚期血吸蟲病。

      診斷依據

      3.1流行病學史(參見附錄A

      3.1.1發病前2周至3個月有疫水接觸史。

      3.1.2居住在流行區或曾到過流行區有多次疫水接觸史。

      3.2臨床表現(參見附錄A

      3.2.1發熱、肝臟腫大及周圍血液嗜酸粒細胞增多為主要特征,伴有肝區壓痛、脾臟腫大、咳嗽、腹脹及腹瀉等。

      3.2.2無癥狀,或間有腹痛、腹瀉或膿血便。多數伴有以左葉為主的肝臟腫大,少數伴脾臟腫大。

      3.2.3臨床有門脈高壓癥狀、體征,或有結腸肉芽腫或侏儒表現。

      3.3實驗室檢測

      3.3.1下列試驗至少有一種反應陽性(見附錄B

      3.3.1.1間接紅細胞凝集試驗。

      3.3.1.2酶聯免疫吸附試驗。

      3.3.1.3膠體染料試紙條法試驗。

      3.3.1.4環卵沉淀試驗。

      3.3.1.5斑點金免疫滲濾試驗。

      3.3.2糞檢找到血吸蟲蟲卵或毛蚴(見附錄C)。

      3.3.3直腸活檢發現血吸蟲蟲卵(見附錄C)。

      3.4吡喹酮試驗性治療有效

      診斷原則

      根據流行病學史、臨床表現及實驗室檢測結果等予以診斷。

      診斷標準

      5.1急性血吸蟲病

      5.1.1疑似病例:應同時符合3.1.13.2.1

      5.1.2臨床診斷病例:應同時符合疑似病例和3.3.13.4

      5.1.3確診病例:應同時符合疑似病例和3.3.2

      5.2慢性血吸蟲病

      5.2.1臨床診斷病例:應同時符合3.1.23.2.23.3.1

      5.2.2確診病例:應同時符合3.1.23.2.23.3.23.3.3

      5.3晚期血吸蟲病

      5.3.1臨床診斷病例:應同時符合3.1.23.2.33.3.1(既往確診血吸蟲病者可血清學診斷陰性)。

      5.3.2確診病例:應同時符合3.1.23.2.33.3.23.3.3

      鑒別診斷(參見附錄D

      6.1急性血吸蟲病的鑒別診斷

      瘧疾、傷寒、副傷寒、肝膿腫、敗血癥、粟粒型肺結核、鉤端螺旋體病等疾病的一些臨床表現與急性血吸蟲病相似,應注意鑒別。

      6.2慢性血吸蟲病的鑒別診斷

      慢性痢疾、慢性結腸炎、腸結核以及慢性病毒性肝炎等疾病的癥狀有時與慢性血吸蟲病相似,應注意鑒別。

      6.3晚期血吸蟲病的鑒別診斷

      應注意結節性肝硬化、原發性肝癌、瘧疾、結核性腹膜炎、慢性粒細胞性白血病等與晚期血吸蟲病有相似臨床癥狀疾病的鑒別。

      附錄A

      (資料性附錄)

      流行病學及臨床表現

      A.1流行病學

      血吸蟲病在我國流行于長江流域及其以南地區,分布在湖北、湖南、江西、安徽、江蘇、四川、云南、廣東、廣西、上海、福建、浙江等12個省、直轄市、自治區。流行區最東為上海市南匯區,東經121°51′;最南為廣西的玉林市,北緯22°20′;最西為云南省云龍縣,東經99°04′;最北為江蘇省寶應縣,北緯33°15′。血吸蟲病的傳播具有地方性和季節性特點,血吸蟲病是人獸共患病,人和40多種哺乳動物均可感染血吸蟲病,釘螺是血吸蟲的唯一中間宿主。人或其他哺乳動物接觸了疫水后感染血吸蟲。

      影響血吸蟲病的流行因素包括自然因素和社會因素兩方面。自然因素如地理環境、氣溫、雨量、水質、土壤、植被等。社會因素是指影響血吸蟲病流行的政治、經濟、文化、生產方式、生活習慣等。

      A.2臨床表現

      A2.1急性血吸蟲病

      對發生于初次感染者,在接觸疫水后1d2d內,在接觸部位的皮膚出現點狀紅色丘疹,部分病人感到癢。突出癥狀是發熱,特點是病人體溫午后開始逐漸升高,傍晚時達到高峰,至午夜大汗熱退,熱退后病人癥狀明顯減輕。病人絕大多數有肝臟腫大,并伴有壓痛。感染較重者或反復感染者可出現脾臟腫大。若不及時治療,會迅速出現消瘦、貧血、營養性水腫和腹水,可導致死亡。

      A2.2慢性血吸蟲病

      輕者可無明顯癥狀,或偶有輕度肝臟或脾臟仗大,多數肝功能正常。但可因重復感染而出現明顯的癥狀與體征。常見的癥狀有間歇性慢性腹瀉、慢性痢疾。腹瀉、粘液血便常于勞累后加重。有的可表現明顯的肝臟腫大,以左葉顯著,且部分人有脾臟腫大。嗜酸粒細胞多數增高。

      A2.3晚期血吸蟲病

      患者常有不規則的腹痛、腹瀉或大便不規則、納差、食后上腹部飽脹感等癥狀。時有低熱、消瘦、乏力,導致勞動力減退。常伴有性功能減退。肝臟腫大,質硬,無壓痛。脾臟腫大明顯,可達臍下。腹壁靜脈曲張。進一步發展可并發上消化道出血、腹水、黃疸,甚至出現肝昏迷。患者可因免疫功能低下,易并發病毒性肝炎而明顯加重病情。晚期血吸蟲病分為4種類型:①巨脾型:指脾臟腫大超過臍平線或橫徑超過腹中線者。②腹水型:患者常在上消化道出血、合并感染、過度勞累或使用損害肝臟的藥物后誘發,腹水可時消時現,病程從數年到10年以上。③結腸增厚型:亦稱結腸肉芽腫型或結腸增殖型。常表現有腹痛、腹瀉、便秘或腹瀉與便秘交替。左下腹可觸及腫塊或索條狀物,有輕度壓痛。④侏儒型:系兒童時反復多次感染血吸蟲,又未及時治療所致,患者發育遲緩,身體矮小。實驗室檢查多見貧血、肝功能異常,嚴重病例(如腹水)可出現水電解質平衡紊亂。

      附錄B

      (規范性附錄)

      血清學檢查

      B.1間接紅細胞凝集試驗(IHA

      B.1.1抗原:為用葡聚糖凝膠G100初步純化的SEA致敏的綿羊紅細胞。所用綿羊紅細胞先經2.5%戊二醛化及15000鞣酸溶液鞣化后再行致敏。致敏后的紅細胞以含10%蔗糖及1%正常兔血清的PH7.2PBS5%懸液,分裝安瓿低壓凍干封存。每批致敏紅細胞作效價測定,滴度達1128012560為合格。抗原也可采用SEAAUA的混合抗原;血球也可采用人“O”型紅細胞。

      B.1.2操作方法

      B.1.2.1啟開安瓿,每支以1ml蒸餾水稀釋混勻備用。

      B.1.2.2用微量滴管加4滴(0.025ml/滴)生理鹽水于微量血凝反應板第一排第二孔內,第三孔空白,第四孔加1滴。

      B.1.2.3第一孔內儲存待檢血清,并從中吸取血清1滴加入第二孔內,充分混勻后,吸出兩滴于第三孔和第四孔各加1滴。在第四孔混勻后棄去1滴使第三孔、第四孔血清稀釋度為15110

      B.1.2.4用定量吸管吸取致敏紅細胞懸液,于第三孔和第四孔內各加1滴,立即旋轉震搖2min,室溫下靜置1h左右,觀察結果。

      B.1.2.5每次試驗均應有陽性血清作陽性對照,生理鹽水作陰性對照。

      B.1.3結果判斷

      B.1.3.1陰性反應為紅細胞全部沉入孔底,肉眼見一邊緣光滑,致密的小圓點。

      B.1.3.2陽性反應:

      ++++ 紅細胞形成薄層凝集,邊緣呈現不規則的皺褶。

      +++ 紅細胞形成薄層凝集,充滿整個孔底。

      ++ 紅細胞形成薄層凝集,面積較+++者小。

       紅細胞大部分沉集于孔底,形成一圓點,周圍有少量凝集的紅細胞,肉眼見周邊模糊(或中間出現較為明顯的空白點)。

      B.1.4反應標準:以血清110稀釋出現凝集反應可判為陽性。

      B.2 酶聯免疫吸附試驗(ELISA

      B.2.1抗原或抗體:常用SEA包被載體檢測抗體,亦可用單克隆抗體包被載體以檢測抗原。

      B.2.2操作方法

      B.2.2.1于微量聚苯乙烯或聚氯乙烯塑料板的凹孔中加入100μlPH9.6碳酸鹽緩沖液稀釋的SEA或單克隆抗體,置4℃過夜。

      B.2.2.2次日傾去抗原,用含有0.05%吐溫-20的磷酸緩沖鹽水(PBS-T PH7.40.01mol/L)洗滌3次,每次5 min

      B.2.2.3于凹孔中加入以PBS-T1100  1200稀釋的受檢者血清及參考血清(每批設1個陰性對照和1個陽性對照)100μl37℃,1h

      B.2.2.4傾去血清,以PBS-T洗滌3次,每次5 min

      B.2.2.5加入以PBS-T11000  14000稀釋的辣根過氧化物酶(HRP-標記結合物100μl37℃,1h

      B.2.2.6傾去酶標記結合物,以PBS-T洗滌3次,每次5 min

      B.2.2.7加入100μl已加H2O2的鄰苯二胺(OPD)或四甲基聯苯胺(TMB)底物溶液,37℃,30min

      B.2.2.8在各凹孔中加入2mol/L硫酸(H2SO450μl以終止反應。

      B.2.2.9在酶標專用比色計上讀取492nmOPD為底物)或450 nmTMB為底物)光密度(OD)值,以P/N≥2.1倍判為陽性。

      B.3膠體染料試紙條法試驗(DDIA

      B.3.1抗原:膠體染料標記的血吸蟲SEA

      B.3.2操作方法

      B.3.2.1輕輕混勻抗原貯存管中膠體染料標記的抗原液。

      B.3.2.250μl標記液至PVC小杯中,再入10μl待檢血清,緩緩混勻1min

      B.3.2.3取試紙條插入小杯中,約10min左右,待對照帶區出現紫藍色反應帶,即可判斷結果。

      B.3.3結果判斷

      以檢測帶區和對照帶區均出現紫藍色反應帶為陽性;以對照帶出現紫藍色反應帶,而檢測帶區無反應為陰性。

      B.4環卵沉淀試驗(COPT

      B.4.1蟲卵:熱處理超聲干燥蟲卵粉。以重感染兔血清(接種尾蚴15002000條,42 d的兔血清)測試環沉率>30%為合格。

      B.4.2操作方法:先用熔化的石蠟在潔凈的載玻片兩端分別劃兩條相距20mm的蠟線,在蠟線之間加受檢者血清2滴(0.05 ml0.10 ml),然后用針頭挑取干卵約100個~150個,加入血清中,混勻,覆以24mm×24mm蓋玻片,四周用石蠟密封后,置于37℃溫箱中,經48h72h后用低倍(80×100×)顯微鏡觀察反應結果,疑似者應在高倍(400×)顯微鏡下加以識別。

      為簡化操作亦可選用預制的有雙圓孔的雙面膠紙條,只需在圓孔中加入干卵和50μl血清,覆以蓋玻片,置37℃孵箱中48h,觀察結果。或選用預制干卵PVC膜片,只需加入血清,置濕盒中37℃保溫經24h取出,傾去血清,加少量鹽水顯微鏡下觀察反應。

      B.4.3反應標準:典型的陽性反應蟲卵周圍有泡狀、指狀或細長卷曲的帶狀沉淀物,邊緣較整齊,有明顯的折光。其中泡狀沉淀物須大于10μm(約相當于兩個紅細胞大小),才能定為陽性。陽性反應的標本片,應觀察100個成熟蟲卵,計算其沉淀率;陰性者必須看完全片。

      陰性反應:蟲卵周圍光滑,無沉淀物;或有小于10μm的泡狀沉淀物。

      陽性反應的強度和環沉率:

      蟲卵周圍出現泡狀、指狀沉淀物的面積小于蟲卵面積的1/4;細長卷曲的帶狀沉淀物小于蟲卵的長徑。

      ++蟲卵周圍出現泡狀、指狀沉淀物的面積大于蟲卵面積的1/4;細長卷曲的帶狀沉淀物相當于或超過蟲卵的長徑。

      +++蟲卵周圍出現泡狀、指狀沉淀物的面積大于蟲卵面積的1/2;細長卷曲的帶狀沉淀物相當于或超過蟲卵長徑的2倍。

      計算 環沉率(%=陽性蟲卵數/全片觀察成熟蟲卵數×100%

      環沉率≥3%時,判為陽性。

      B.5斑點金免疫滲濾試驗(DIGFA

      B.5.1抗原:1%血吸蟲SEA

      B.5.2操作方法

      B5.2.1在小盒中央膜上加B液(PH8.20.02M TRIS-Hcl緩沖液)2滴(100μl),待滲入。

      B.5.2.2加待檢血清25μl,待滲入。

      B.5.2.3B2滴(100μl),待滲入。

      B.5.2.4加入A液(金標記SPA或抗人IgG結合物)2滴,待滲入。

      B.5.2.5B2滴(100μl),待滲入。

      B.5.3結果判斷:在膜上顯示紅色斑點為陽性,僅留白色背景為陰性。色澤接近標準陽性者為+,色澤與陽性血清一致者為++,色澤深于標準陽性者為+++。

      附錄C

      (規范性附錄)

      病原學檢查

      C.1糞便檢查

      C.1.1尼龍絹袋集卵孵化法

      操作步驟:取受檢者糞便約30g,先置于40目~60/25.4mm的銅絲篩中,銅絲篩置于下口夾有鐵夾的尼龍絹(260/25.4mm)袋口上,淋水調漿,使糞液直接濾入尼龍絹袋中,然后移去銅絲篩,繼續淋水沖洗袋內糞渣,并用竹筷在袋外輕輕刮動助濾,直到濾出液變清。取下夾于袋底下口的鐵夾,將袋內沉渣淋入三角燒瓶。如需加做沉淀鏡檢,可在燒瓶中吸取沉渣3滴~4滴放在載玻片上,抹成涂片,涂面應占載玻片面積的2/3。涂片的厚度以能透過涂片尚能看清印刷字體為標準,將涂片置于低倍顯微鏡下檢查。全片鏡檢時間不宜少于2min,每份糞便至少檢查兩張涂片,鏡檢時應仔細識別血吸蟲卵和其他蠕蟲卵。然后將盛有糞便沉渣的三角燒瓶加水至離瓶口1cm處,放入孵化室(箱)或在室溫下孵化。一定時間后取出燒瓶,觀察毛蚴。一般需觀察2次~3次,觀察時間隨溫度高低而不同。溫度高時孵出較早;溫度低時毛蚴孵出遲。氣溫超過30℃時,第1次觀察可在0.5h1h后進行,陰性者可在4h后觀察第2次,8h觀察第3次,3次均為陰性者,判作陰性結果;氣溫在26℃~30℃時,可在孵化后4h開始觀察,陰性者8h12h再觀察1次;氣溫在20℃~25℃時,則可在8h后觀察第1次,12h后觀察第2次;如利用自然氣溫孵化,一晝夜之間的氣溫懸殊,可在操作后的次晨再觀察1次。一般室溫在25℃以上時,可利用自然氣溫孵化,無需加溫。

      觀察毛蚴時,應將燒瓶向著光源,并襯以黑紙板。要注意毛蚴與水中原生動物的區別。如有懷疑,可用毛細吸管吸出,在顯微鏡下鑒別。

      C.1.2改良加藤厚涂片法

      操作步驟:置尼龍絹片(80目~100/25.4mm)于受檢糞樣上,用軟性塑料刮片在尼龍絹片上輕刮,糞便細渣即由絹片微孔中露至絹片表面。將定量板(3cm×4cm×2.5mm,板中圓孔的孔徑為3.5mm,刮平后,孔中可容糞量41.7mg)放在載玻片中部,以刮片從尼龍絹片上刮取細糞渣填入定量板的中央孔中,填滿刮平。小心提起定量板,糞樣即留在載玻片上。取一張經甘油-孔雀綠溶液浸漬24h的親水性玻璃紙(30 mm×30mm),蓋在糞便上,用橡皮塞或另一塊載玻片覆于玻璃紙上輕壓,使糞便均勻展開至玻璃紙邊緣。編號后置于25℃室溫,相對濕度75%下過夜,鏡檢。否則會因透明過度而漏檢。每份糞樣至少需做2張涂片,以鏡檢每片平均檢出的蟲卵數乘以24即為1g糞便中的蟲卵數(EPG)。

      C.1.3集卵透明法

      操作步驟:將糞便充分攪勻后,取5g置于搪瓷杯中,加水調成糞液。把糞液通過60/25.4mm的銅絲篩淋水濾入2只套疊在一起的尼龍袋中(袋深20cm ,袋口直徑8cm,外袋260/25.4mm,內袋120/25.4mm)。然后移去銅絲篩,繼續淋水沖洗袋內糞渣,并把袋輕輕振蕩,使加速過濾,直至濾出液變清為止。用藥勺刮取外袋內全部沉渣,分作涂片。

      在沉渣圖片上,覆蓋經甘油-孔雀綠溶液浸漬24h的親水性玻璃紙(2cm ×5cm),以玻片壓勻,置室溫中過夜,次日鏡檢。以全部沉渣獲得的蟲卵數相加,再除以5得出每克糞便中蟲卵數(EPG)。

      C.2直腸活組織檢查

      按醫院常規進行。本法可用于醫院和血防站內對疑似病人的診斷,不宜用于普查。

      附錄D

      (資料性附錄)

      鑒別診斷

      D.1急性血吸蟲病的鑒別診斷

      D.1.1瘧疾  大多數病人有寒戰;間歇型發熱可每日發作,但多為隔日發作;肝臟腫大不明顯;白細胞計數往往正常或減少,嗜酸粒細胞百分比不增高;血液檢查可找到瘧原蟲。

      D.1.2傷寒、副傷寒   持續高熱,表情淡漠,相對緩脈。起病第二周胸腹壁出現少量斑丘疹(玫瑰疹)。白細胞計數減少及嗜酸粒細胞百分比減低甚至降至零;早期血細菌培養、后期尿及糞培養可獲傷寒桿菌。肥達反應在急性血吸蟲病病人中亦可出現陽性,如病程中凝集價持續增高,則傷寒的可能性較大。

      D.1.3肝膿腫  病人常有肝區疼痛,壓痛極為明顯,且較局限。X線透視下,常見到右側橫膈抬高,表面不整齊以及運動障礙等現象。B型超聲檢查肝膿腫病人肝區探查可見蜂窩狀結構,回聲較低,液化處出現無回聲區,如行肝穿刺獲得典型的膿液。

      D.1.4敗血癥  弛張熱、畏寒、出汗、全身關節酸痛、毒血癥和白細胞總數及中性粒細胞增高等為其特征。皮膚粘膜常有出血點。多伴有皮下膿腫、肺炎、胸膜炎、膽道及泌尿道感染等感染性疾病。血細菌培養常可出現陽性。

      D.1.5粟粒型肺結核  發熱多為弛張熱,白細胞總數近正常,中性粒細胞有時偏高。肺部X線攝片可協助診斷。

      D.1.6鉤端螺旋體病  潛伏期較短,一般為8d12d,病程亦短,一般為1周~2周;臨床表現多為流感傷寒型,病人先有寒戰,繼而發熱,并有頭痛、眼結膜充血、怕光及全身肌肉疼痛等;肌肉疼痛尤以腰、頸及腓腸肌痛為明顯;白細胞總數升高,以中性粒細胞為主,占0.800.90。在發病第1周的血液和第2周的尿內,可找到鉤端螺旋體,血培養可分離出病原體。發病2周以后,病人血清中出現抗體,凝集試驗或補體結合試驗可呈陽性。

      D.2慢性血吸蟲病的鑒別診斷

      慢性痢疾、慢性結腸炎、腸結核以及慢性病毒性肝炎等疾病的癥狀有時與慢性血吸蟲病相似,應注意鑒別。慢性痢疾或腸炎糞便培養可獲致病菌或阿米巴原蟲。腸結核多繼發于肺或其他部位的結核病,常伴有發熱等毒性癥狀,胃腸道鋇餐或內鏡檢查均有助于明確診斷。慢性病毒性肝炎病人大多有食欲減退、肝區脹痛、腹脹、乏力等表現,轉氨酶常反復增高。乙型肝炎抗原、抗體檢測有助于鑒別。

      D.3晚期血吸蟲病的鑒別診斷

      D.3.1結節性肝硬化 多由病毒性肝炎引起。肝細胞損害較明顯,臨床上乏力、食欲減退、腹脹、黃疸、蜘蛛痣、肝掌及男性乳房腫大等較為多見。肝臟表面有時可捫及較粗大的結節,后期肝臟常萎縮而難以觸及。脾臟腫大不明顯。肝功能損害顯著,血清丙氨酸轉氨酶常增高。乙型肝炎表面抗原(HBsAg)及核心抗體(抗HBc)測定可呈陽性,病程進展快,預后較差。但應注意晚期血吸蟲病可并存乙型肝炎病毒(HBV)感染,表現為以肝炎后肝硬化為主的混合性肝硬化。

      D.3.2原發性肝癌  病程進展迅速,常有發熱、體重顯著減輕,肝區持續疼痛,肝呈進行性腫大,質地堅硬,表面凸凹不平,可出現迅速加深的黃疸和急劇增加的腹水,腹水呈草黃色或學性。血清堿性磷酸酶增高,甲胎蛋白(AFP)陽性。肝臟B超檢查、放射性核素掃描和電子計算機X線體層攝影(CT)顯示占位性病變。

      D.3.3瘧疾  一些瘧疾病人脾臟可明顯腫大,但瘧疾病人有反復發作的瘧疾病史,血涂片檢查可找到瘧原蟲,抗瘧疾治療效果好。

      D.3.4結核性腹膜炎  無門脈高壓癥,常有發熱及肺部原發結核病灶,腹水量少或中等,為滲出液,少數呈血性。

      D.3.5慢性粒細胞性白血病  脾臟明顯腫大,可達巨脾程度,常伴有低熱,血液檢查周圍血液中白細胞數顯著增多,并有幼稚白細胞,骨髓檢查有助診斷。

       

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